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桉树组培技术
 
来源:互联网 日期:[2012-11-28]

    桉树组培获得成功,主要解决了一些难以生根的树种或无法采用扦插方法增繁无性系的繁殖问题,加快优良无性系化的繁殖速度,同时无性系组培苗可直接上山造林,但组培技术操作要求严格,采用无菌操作,且成本较高,对大面积造林来说不利于产出的经济效益,因此目前生产单位通常使用组培方法培育扦插母株作为扦插扩大材料,然后通过扦插繁殖生产大量花卉苗木营建速生丰产林与诸如嫁接苗芽条和萌芽条等相比,组培苗芽条的幼态化最佳,有分生机能的薄壁细胞活跃、再生能力比较强、扦插更容易生根成活。

    一实验室设备及其操作

    桉树组织培养是一项技术性很强的工作,无菌条件要求严格,对实验室设备及人员的操作技术要求较高,组培实验室应配备下列设备。

    第一洗涤设备、设置洗涤室、洗涤剂及各种洗涤工具

    第二灭菌设备、设置高压高温灭菌锅、烘箱等

    第三化学实验设备、设置实验台架、药品柜、冰箱、离心机、天平、各种、玻璃器皿、PH计、搅拌器、蒸馏器等

    第四无菌操作设备、设置无菌室、超净台、接种箱、超净室及接种工具、镊子、剪刀、解剖刀、接种铲及酒精灯等

    第五培养设备、设置培养箱室、培养容器、三角瓶、试管、罐头瓶等

    二培养基及其附加成分

    植物组织培养应用的培养基,一般都包括大量元素、微量元素和碳水化合物,并添加各种各样的附加物,如维生素、氨基酸、生长素、细胞分裂素等。

    桉树芽的诱导可选用White、B5H、N6、和MS等作基本培养基、胚状体的诱导可选用B5H及改良H等作基本培养基。

    三桉树组培技术

    桉树组织培养技术通常有两种方法一是取植株嫩茎段或不定芽接种培养形成愈伤组织分化长成完整植株二是取无菌种子或无茵发芽后的苗段诱导胚状体。

    生长成完整植株。

    1愈伤组织形成和分化

    1外植体的采集

    采集对象为嫁接苗或伐桩、环割、萌芽条、截取具有半木质化程度的嫩梢长度为5~10cm试验证明,3~5月份桉树萌芽率较高,茎部积累有较丰富的营养物质和内源激素,受病虫侵害较少、外植体诱导成功率最高,7~9月份属高温高湿季节,水分、温度都较高、病虫十分活跃、茎段机械损伤较多、易受病、虫菌的侵害污染,诱导成功率最低,因此外植体采集最好是在春季进行,以芽条腋芽开始膨大,芽鳞片还未裂开时为最佳时机,芽条在植株上的部位也是诱导芽能否成功的重要因素,试验证明,萌芽条中上部的茎段,第5~第7节最好,(中下部第8~第10节)茎段木质化程度较好。芽不易萌动、易褐化、梢部因芽组织幼嫩、消毒时易被杀伤、褐化严重,另外,枝条修剪萌发的枝条,且用抗菌素溶液和杀菌剂预处理后诱导效果也不错。

    2外植体消毒

    将采回的桉树嫩茎段剪去叶片,用自来水洗干净,在无菌条件下用70%酒精浸泡10秒钟,再用新洁尔灭溶液或0.1升汞溶液浸5~6分钟消毒,用无菌水冲洗4~5次,然后切取含1~2个腋芽的茎段接种在培养基上进行诱导培养,试验证明,重复消毒一次效果更佳。

    3褐变及其预防

    桉树茎段接种后,如切口处产生褐色渗出物,使茎段周围的培养基变成棕褐色,茎段在培养基内的基部变褐色就会失去生命力,导致外植体死亡、严重地影响了外植体诱导的成功率,可采取以下措施综合防治。尽量避免组织伤害,用于切割的解剖刀应尽可能锋利,切割外植体时,把组织浸于水中隔绝空气、切面要垂直、切口的损伤要减至最低的限度,接种时选择表面消毒过程中没有损伤的茎段,注意不让腋芽附着培养基,利用漫射光培养,由于光能提高多氧化酶的活性,从而促进多酚化合物的氧化,因此在弱光下培养,能有效地降低多酚氧化物的氧化。及时转移培养基,当发生褐变时应及时转移培养基,使褐化不影响腋芽周

    围的组织,外植体仍有萌动的生命力。

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